
เทคโนโลยีทางการแพทย์ Huaren
บริการด้านการวิจัยและพัฒนา
การวิจัยทางวิทยาศาสตร์ขั้นพื้นฐาน
การวิจัยทางวิทยาศาสตร์ขั้นพื้นฐาน

การทดลองทางชีววิทยาโมเลกุล
• เทคโนโลยี RISPR/Cas9
โดยสรุปแล้ว CRISPR/Cas9 คือเทคโนโลยีชีววิทยาโมเลกุลที่นักวิจัยสามารถใช้แก้ไขยีนในเซลล์และสิ่งมีชีวิตได้ การแก้ไขยีนที่เรียกว่านี้เป็นการดัดแปลงสารพันธุกรรมภายในสิ่งมีชีวิตผ่านวิธีการและเทคนิคทางชีววิทยาบางอย่าง เทคโนโลยี CRISPR/Cas9 ซึ่งพัฒนาขึ้นจากระบบภูมิคุ้มกันที่ได้มาของโปรคาริโอต ประกอบด้วยส่วนประกอบสำคัญเพียงสองส่วน ได้แก่ โปรตีน Cas9 ซึ่งทำหน้าที่ตัด DNA แบบสองสาย และ sgRNA (single guide RNA) ซึ่งมีหน้าที่นำทาง เมื่อทั้ง sgRNA และโปรตีน Cas9 แสดงออกในเซลล์ โปรตีน Cas9 จะจับกับ sgRNA และกำหนดเป้าหมายไปยังลำดับ DNA เป้าหมายเพื่อทำการตัด DNA แบบสองสาย ซึ่งจะกระตุ้นกลไกการซ่อมแซม DNA ภายในเซลล์หลังจากการตัดลำดับ DNA เพื่อสร้างการแตกหัก ในเซลล์ยูคาริโอต การซ่อมแซมโดยการรวมตัวกันแบบ homologous และการซ่อมแซมโดยการรวมตัวกันแบบ non-homologous ต่างมีอยู่ ในการซ่อมแซมโดยการรวมตัวกันแบบ homologous โครโมโซมที่แตกหักจะได้รับการซ่อมแซมโดยใช้โครมาทิดน้องสาวที่สมบูรณ์อีกอันเป็นแม่แบบ ในขณะที่ในการซ่อมแซมโดยการรวมตัวกันแบบ non-homologous DNA ที่แตกหักจะได้รับการซ่อมแซมแบบสุ่ม ฐานใหม่จะถูกนำมาใช้ และการกลายพันธุ์ที่ทำให้รหัสเปลี่ยนแปลงเกิดขึ้นในยีน


• ELISA
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) เป็นเทคนิคที่แอนติเจนหรือแอนติบอดีถูกดูดซับบนพื้นผิวของตัวพาแบบเฟสแข็ง เพื่อให้ปฏิกิริยาแอนติเจน-แอนติบอดีที่ติดฉลากเอนไซม์เกิดขึ้นบนพื้นผิวของเฟสแข็ง เทคนิคนี้สามารถใช้ในการตรวจหาแอนติเจนโมเลกุลขนาดใหญ่และแอนติบอดีจำเพาะ ฯลฯ มีข้อดีคือรวดเร็ว ความไวสูง ง่าย และการทำให้มาตรฐานของตัวพาทำได้ง่าย
• การสกัดกรดนิวคลีอิก
การสกัดกรดนิวคลีอิกเป็นส่วนประกอบพื้นฐานของชีววิทยาโมเลกุล และกรดนิวคลีอิกคุณภาพสูงมีความสำคัญต่อการประยุกต์ใช้ในชีววิทยาโมเลกุล การสกัดกรดนิวคลีอิกให้คำตอบสำหรับการศึกษาและการประยุกต์ใช้ที่หลากหลาย (เช่น การโคลนนิ่ง qRT-PCR และเทคโนโลยีการจัดลำดับรุ่นที่สองในบริบทของจีโนมและทรานสคริปโตมทั้งหมด) และกรดนิวคลีอิกที่ได้สามารถนำไปใช้ในวิธีต่างๆ ในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนในการวิจัยพื้นฐานและโรค การติดตามการตอบสนองต่อการรักษาด้วยยา การระบุชนิดพันธุ์ใหม่ และการให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกระบวนการวิวัฒนาการ และการวินิจฉัยโรค


• การสกัดพลาสมิด
พลาสมิดส่วนใหญ่เป็นโมเลกุล DNA แบบวงกลมสองสาย ซึ่งเป็นหน่วยพันธุกรรมเสริมสำหรับการจำลองแบบและการถ่ายทอดทางพันธุกรรมที่เป็นอิสระจากโครโมโซมของแบคทีเรีย พลาสมิดเป็นพาหะ DNA หลักที่ใช้ในการทดลองชีววิทยาโมเลกุลและวิศวกรรมพันธุกรรมเพื่อปรับปรุงสายพันธุ์
• การตรวจจับ CHIP
กรดนิวคลีอิกและโปรตีนเป็นโมเลกุลชีวภาพขนาดใหญ่หลักที่ประกอบขึ้นเป็นสิ่งมีชีวิต และปฏิกิริยาระหว่างกันเป็นพื้นฐานของกิจกรรมของสิ่งมีชีวิต เช่น การเจริญเติบโต การสืบพันธุ์ การเคลื่อนไหว การถ่ายทอดทางพันธุกรรม และการเผาผลาญที่ประกอบขึ้นเป็นกิจกรรมของสิ่งมีชีวิต การศึกษาปฏิกิริยาระหว่างโปรตีนและกรดนิวคลีอิกเป็นกุญแจสำคัญสำหรับผู้คนในการสำรวจความลึกลับของปรากฏการณ์ชีวิต และการทดลองตรวจจับ CHIP เป็นข้อมูลอ้างอิงที่สำคัญที่ใช้กับความสัมพันธ์ของปฏิกิริยาระหว่างโปรตีนและกรดนิวคลีอิก


• การตรวจจับ Co-Ip
Co-IP ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการตรวจจับปฏิกิริยาระหว่างโปรตีนกับโปรตีน และเป็นส่วนขยายของการทดลอง IP โดยพิจารณาจากศักยภาพของปฏิกิริยา IP ในการจับและทำให้เป้าหมายหลัก (แอนติเจน ฯลฯ) และโมเลกุลขนาดใหญ่อื่นๆ ที่จับกับเป้าหมายผ่านปฏิกิริยาตามธรรมชาติในสารละลายตัวอย่างบริสุทธิ์ นอกจากนี้ Co-IP สามารถใช้เพื่อกำหนดปฏิกิริยาของโปรตีนภายใต้เงื่อนไขต่างๆ
• การทดสอบ Immunoblot (Western blot)
การตรวจวัดโปรตีนด้วยวิธี immunoblotting (Western Blot) หรือเรียกสั้นๆ ว่า WB หมายถึงการแยกโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลแตกต่างกันด้วยเจล SDS-PAGE จากนั้นถ่ายโอนโปรตีนเป้าหมายไปยังเมมเบรนตัวพา (PVDF) โดยใช้การจับกันจำเพาะของแอนติเจนและแอนติบอดี โปรตีนเป้าหมายจะถูกจับโดยแอนติบอดีปฐมภูมิจำเพาะ และแอนติบอดีปฐมภูมิจะถูกจับโดยแอนติบอดีทุติยภูมิที่ติดฉลาก HRP จากนั้นจึงแสดงสีด้วยของเหลวเรืองแสง ECL และสามารถตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีนจำเพาะบางชนิดหรือโปรตีนจำเพาะบางชนิดในเนื้อเยื่อหรือเซลล์ได้ การตรวจวัดโปรตีนด้วยวิธี immunoblotting เป็นวิธีการวิเคราะห์การแสดงออกของโปรตีนจำเพาะบางชนิดในเนื้อเยื่อหรือเซลล์ การตรวจวัดโปรตีนด้วยวิธี immunoblotting เป็นเทคนิคปกติสำหรับการวิเคราะห์โปรตีน ซึ่งใช้กันทั่วไปสำหรับการระบุโปรตีนบางชนิด การวิเคราะห์โปรตีนเชิงคุณภาพและกึ่งเชิงปริมาณ รวมทั้งการวิเคราะห์ปฏิกิริยาระหว่างโปรตีน-โปรตีน โปรตีน-DNA โปรตีน-RNA ต่อไป ฯลฯ ปัจจุบันเทคโนโลยี WB ถูกนำไปใช้กันอย่างแพร่หลายในหลายสาขาการวิจัย เช่น การศึกษาการแสดงออกของโปรตีน การตรวจหาฤทธิ์ของแอนติบอดี และการวินิจฉัยโรคในระยะเริ่มต้น การตรวจหาการแสดงออกของโปรตีนจำเพาะบางชนิดหรือบางชนิดในเนื้อเยื่อหรือเซลล์ การตรวจวัดโปรตีนด้วยวิธี immunoblotting เป็นเทคนิคปกติสำหรับการวิเคราะห์โปรตีน ใช้กันทั่วไปในการระบุโปรตีน และสามารถวิเคราะห์โปรตีนเชิงคุณภาพและกึ่งเชิงปริมาณได้ แต่ยังสามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์ปฏิกิริยาระหว่างโปรตีน-โปรตีน โปรตีน-DNA โปรตีน-RNA ต่อไปได้

• การวัดปริมาณด้วย Flow Cytometry
Flow cytometry (FCM) เป็นเทคโนโลยีการวิเคราะห์และการคัดแยกเชิงปริมาณของเซลล์เดี่ยวโดยใช้ flow cytometry Flow cytometry เป็นเทคโนโลยีแอนติบอดีโมโนโคลนัลและ immunocytochemistry เทคโนโลยีเลเซอร์และวิทยาศาสตร์คอมพิวเตอร์ และการใช้ผลิตภัณฑ์ไฮเทคอื่นๆ ที่พัฒนาและครอบคลุมอย่างมาก


• การตรวจวัดปริมาณ PCR แบบฟลูออเรสเซนส์
การตรวจวัดปริมาณ PCR แบบฟลูออเรสเซนส์เป็นวิธีที่ใช้กันมากที่สุดในการตรวจหาปริมาณ RNA ในตัวอย่างทางชีวภาพ ผ่านสีย้อมเรืองแสงหรือโพรบจำเพาะที่ติดฉลากเรืองแสง ผลิตภัณฑ์ PCR จะถูกติดฉลากและติดตาม และกระบวนการปฏิกิริยาจะถูกตรวจสอบแบบออนไลน์แบบเรียลไทม์ และเมื่อรวมกับซอฟต์แวร์ที่เกี่ยวข้อง ผลิตภัณฑ์สามารถวิเคราะห์ได้และสามารถคำนวณความเข้มข้นเริ่มต้นของแม่แบบของตัวอย่างที่จะทดสอบได้ ปัจจุบัน วิธี Sybrgreen และ taqman ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการตรวจหาปริมาณ RNA
• การทดสอบการมี methylation ของ DNA
การมี methylation ของ DNA เป็นกลไกสำคัญในการควบคุมการแสดงออกของยีน และการทดสอบการมี methylation ของ DNA หมายถึงการกำหนดระดับการมี methylation ของ DNA ในเซลล์เนื้องอกโดยใช้วิธีการต่างๆ ในการพัฒนาเนื้องอกร้าย สภาวะของการมี methylation จะไม่คงที่ และระดับของ hypomethylation ของจีโนมทั้งหมดในเซลล์เนื้องอกมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับความก้าวหน้าของโรค ขนาดของเนื้องอก และระดับความร้ายแรง และการทดสอบการมี methylation ของ DNA มีความสำคัญอย่างยิ่งในการกำหนดความร้ายแรงของเนื้องอก
